IPTG-reagenssi CAS 367-93-1

IPTG-reagenssiOlemme keskittyneet orgaanisen synteesin teknologiaan vuodesta 2008 lähtien. Voimme kehittää korkealaatuisia-tuotteita täysin riippuvaisesti erinomaisesta T&K-tiimistämme. IPTG, CAS 367-93-1, kemiallinen rakenne koostuu isopropyylistä - Se koostuu D-tiogalaktosidi- ja fosfaattiryhmistä. Niistä - D-tiogalaktosidi on galaktoosin analogi, jossa rikkiatomi korvaa happiatomin. Tämä erityinen glykosidirakenne mahdollistaa IPTG:n sitoutumisen DNA:han ja indusoimaan geeniekspressiota. IPTG:llä on alhainen vesiliukoisuus, mutta se liukenee hyvin fysiologiseen suolaliuokseen ja fosfaattipuskuriin. Se on hapan pKa-arvolla 4,5, mikä liittyy fosfaattiryhmään sen molekyylirakenteessa. Se ei ole helppoa kiteytyä puhtaassa vedessä, mutta se voi muodostaa kiteitä suuripitoisuuksissa liuoksissa tai kun siihen lisätään muita yhdisteitä. Koska IPTG kykenee indusoimaan bakteeriproteiinien ilmentymistä, se on herkkä tietyille mikro-organismeille.

Emme tee mitään häpeää Great Chemistrylle! Älä luota kohtuuttomaan hintaan, vaan vertaa hintaa samalla laadulla.

BiosynteesimenetelmäIPTG-reagenssikäyttää yleensä mikro-organismien tai entsyymien katalyyttistä vaikutusta galaktoosin muuntamiseksi isopropyyliryhmän - - D-tiogalaktosidiksi.

Raaka-aineena galaktoosi

Ensinnäkin on tarpeen käyttää galaktoosia raaka-aineena. Galaktoosi on viiden hiilen sokeri, jota esiintyy laajalti luonnossa ja jota voidaan saada siirapin tai kiteiden muodossa. Biosynteesissä galaktoosi muuttuu isopropyyliksi entsymaattisten reaktioiden sarjan - - D-tiogalaktosidi kautta.

Mikrobiviljely ja galaktoosiaineenvaihdunta

Seuraavaksi on tarpeen valita sopivat mikro-organismit katalyytteiksi, joihin tyypillisesti kuuluvat bakteerit, hiiva ja homeet. Viljele näitä mikro-organismeja viljelyalustassa, jotta ne voivat kasvaa ja lisääntyä sopivissa olosuhteissa. Sillä välin mikro-organismit kuluttavat galaktoosia ravintoaineena ja metaboloituvat halutuksi välituotteeksi sarjan entsymaattisten reaktioiden kautta. Spesifinen reaktiomekanismi ja kemiallinen yhtälö tässä vaiheessa vaihtelevat riippuen mikro-organismien tyypeistä ja viljelyolosuhteista.

Isomerointireaktiossa syntyy isopropyyliryhmä- - D-tiogalaktosidi-5'-fosfaattiesteri

Mikro-organismien tuottamien entsyymien vaikutuksesta välituotteet käyvät läpi isomerointireaktion, jolloin muodostuu isopropyyliryhmiä- - D-tiogalaktosidi-5'--fosfaattiesteriä. Tämän vaiheen reaktiomekanismi on siirtää galaktoosin hydroksyyliryhmä uridiinitrifosfaatiksi, jolloin syntyy isopropyyliryhmä- - D-tiogalaktosidi-5'-fosfaattia ja uridiinidifosfaattia. Erityinen kemiallinen yhtälö on seuraava:

(CH₂VOI)₂CHOH-OH + C₃H₇ClN₂O₂S + UDP → (CH₂VOI)₂CHOH-O-P(U) + C₁₀H₁₅N₅O₁₀P₂ + C₃H₇N

Suojauksenpoistoryhmä muodostaa isopropyyliryhmän - - D-tiogalaktosidin

Viimeinen vaihe on poistaa suojaryhmä isopropyyliryhmästä- - D-tiogalaktosyyli-5'--fosfaattiesterin muuntaminen kohdetuotteeksi isopropyyli- --D-tiogalaktosidiksi. Tämä vaihe vaatii tavallisesti happo- tai alkaliliuoksen käyttöä katalyyttinä reaktion edistämiseksi. Erityinen kemiallinen yhtälö on seuraava:

(CH₂VOI)₂CHOH-O-P(U) + H₂O → (CH₂VOI)₂CHOH-OH + P (i)

Erotus ja puhdistus

Käyttämällä erotus- ja puhdistustekniikoita, kuten uuttamista, adsorptiota, kromatografiaa jne., kohdetuote isopropyyli puhdistetaan - - D--tiogalaktosidi uutettiin reaktioseoksesta. Tämän vaiheen tarkoituksena on poistaa epäpuhtaudet ja parantaa tuotteen puhtautta vastaamaan käytännön sovellusten tarpeita

IPTG-reagenssiIsopropyyli- -D-tiogalaktosidi, englanninkielinen nimi IPTG. Plasebon indusoijana X-gal on kromogeeninen substraatti, joita molempia käytetään sini-valkoiseen seulomiseen. IPTG voisi indusoida Chemicalbook-vektorin lac-operonin DNA-segmentin syntetisoimaan -galaktosidaasin amino-terminaalisen fragmentin, mikä voisi saada aikaan intrageenisen komplementaation (komplementaation) isäntäsolujen koodaaman viallisen -galaktosidaasin kanssa.

1. Biomateriaalin valmistelu:

IPTG:tä voidaan käyttää tiettyjen biomateriaalien, kuten polysakkaridien, liposomien jne., valmistukseen. Sitoutumalla tiettyihin solukalvoihin tai proteiineihin IPTG voi edistää solujen tai kudosten spesifisiä fysiologisia toimintoja tarjoten uusia tutkimusvälineitä ja terapeuttisia strategioita biolääketieteen tekniikan alalle. Esimerkiksi käyttämällä IPTG:tä indusoijana se voi edistää kohdeproteiinien ilmentymistä ja erittymistä muokkausbakteereissa tai hiivasoluissa, joita voidaan käyttää spesifisten toimintojen omaavien biomateriaalien tuottamiseen.

 

Nämä biomateriaalit voivat sisältää polysakkarideja, liposomeja, proteiinikomplekseja jne.
Biomateriaalien valmistusprosessissa IPTG:n käyttö voi yksinkertaistaa tuotantoprosessia, parantaa tuotannon tehokkuutta ja alentaa tuotantokustannuksia. Samanaikaisesti kohdeproteiinin ilmentymistasojen ja biomateriaalien ominaisuuksien tarkka säätely voidaan saavuttaa säätelemällä IPTG-lisäyksen määrää ja kestoa.

2. Huumeseulonta:

 

IPTG:tä käytetään pääasiassa lääkeseulonnassa kohdegeenien ilmentymisen indusoimiseksi ja kohdegeenien ilmentymistuotteiden seulomiseksi. Erityisesti IPTG voi toimia laktoosioperonien indusoijana sitoutumalla lac|:iin tuotteet, jotka aiheuttavat lac:n konformaatiomuutoksia|tuotteet pois lacO:sta, aktivoiden siten transkription ja saavuttaen kohdegeenin korkean ilmentymisen. Sinivalkoisen seulontaprosessin aikana IPTG indusoi transformantit, joissa ei ole rekombinanttiplasmideja, muodostamaan sinisiä pesäkkeitä kromogeenisen substraatin X-gal läsnä ollessa.

Kun vieraita fragmentteja insertoidaan, tuloksena olevat peptidifragmentit menetetään Komplementtikyky: Rekombinanttiplasmideja sisältävät transformoidut rekombinantit voivat muodostaa vain valkoista Escherichia colia kromogeenisellä induktioväliaineella. Tällä värinmuutoksiin perustuvalla lääkeseulontamenetelmällä on tärkeä rooli tiettyihin sairauksiin liittyvien proteiinien tutkimisessa ja uusien lääkekohteiden etsimisessä.

3. Geenitutkimus:

 

IPTG:tä käytetään usein geenitutkimuksessa molekyylityökaluna. Sitoutumalla tiettyyn geenisekvenssiin IPTG voi säädellä kyseisen geenin ilmentymistasoa ja siten tutkia sen suhdetta tiettyihin fenotyyppeihin tai sairauksiin.
Geenitutkimuksessa IPTG:tä käytetään pääasiassa indusoijana ja sillä voidaan simuloida laktoosin induktiovaikutusta laktaasiin. Sitä käytetään yleensä indusoimaan eksogeenisten geenien ilmentymistä, erityisesti molekyylibiologian ja geenitekniikan tutkimuksessa.
IPTG:tä käytettäessä se sitoutuu kohdegeeneihin ilmentämisisännissä, kuten Escherichia colissa. Rakentamalla kohdegeeni sopivien promoottorien ja säätelyelementtien kanssa ekspressiovektoriin, se voi tuottaa proteiineja Escherichia coli -soluissa. Tällä indusoituneella vaikutuksella on suuri merkitys geenien toiminnan, proteiinien vuorovaikutusten tutkimisessa sekä uusien lääkkeiden ja biomateriaalien kehittämisessä.

Lisäksi IPTG:tä voidaan käyttää myös indusoijana proteiinikiteytyskokeissa edistämään proteiinien kiteytymistä. Sen vaikutusmekanismi on muuttaa proteiinien konformaatiota sitoutumalla proteiinien hydrofobisiin alueisiin, mikä edistää aggregaatiota ja kiteytymistä proteiinimolekyylien välillä.

Tämä aggregaatio- ja kiteytysprosessi on palautuva, joten proteiinikiteytys voidaan indusoida lisäämällä IPTG:tä tai proteiinikiteitä voidaan liuottaa poistamalla IPTG.

4. Maataloussovellus:

 

Maataloussovelluksissa,IPTG-reagenssiuudenlaisena biopestisidinä, sillä on rikkakasvien torjunta-ainespesifisiä vaikutuksia. Se voi häiritä galaktoosin normaalia aineenvaihduntaa kasveissa ja vaikuttaa siten niiden normaaliin kasvuun. Tämä häiriömenetelmä on herkempi joillekin rikkakasveille, joten IPTG:tä käyttämällä voidaan tehokkaasti poistaa rikkakasvit vahingoittamatta kasveja. Koska IPTG on uudenlainen biopestisidi, sillä on parempi ympäristöystävällisyys ja parempi turvallisuus ihmisille ja eläimille verrattuna perinteisiin kemiallisiin torjunta-aineisiin. Siksi IPTG:llä on laajat sovellusmahdollisuudet maataloussovelluksissa.

Mahdollinen häiriö geeniekspression säätelyyn

 

Epäspesifinen induktio

IPTG:llä on indusoijana tietty spesifisyys, mutta joissakin tapauksissa voi esiintyä epäspesifistä induktiota. IPTG ei ainoastaan ​​indusoi kohdegeenien ilmentymistä, vaan se voi myös vaikuttaa muiden geenien ilmentymiseen soluissa. Tämä voi johtua siitä tosiasiasta, että kun IPTG on sitoutunut repressoriproteiiniin, se muuttaa repressoriproteiinin konformaatiota ja toimintaa, jolloin sillä on tiettyjä vaikutuksia muihin operoneihin, mikä lievittää ei-kohdegeenin ilmentymisen estoa.

Epäspesifinen induktio voi johtaa muutoksiin solunsisäisissä proteiinien ilmentymisprofiileissa, jolloin syntyy odottamattomia proteiineja, jotka eivät ainoastaan ​​häiritse koetulosten analysointia ja arviointia, vaan voivat myös vaikuttaa haitallisesti solujen normaaleihin fysiologisiin toimintoihin. Esimerkiksi joissakin proteiiniekspressiokokeissa IPTG:llä indusoinnin jälkeen havaittiin kohdeproteiinin ilmentymisen lisääntymisen lisäksi myös joidenkin muiden tuntemattomien proteiinien ilmentymisen lisääntymistä. Nämä ei--spesifiset ekspressoituneet proteiinit voivat häiritä kohdeproteiinin puhdistusta ja toiminnallisia tutkimuksia.

Indusoidun ilmentymisen peruuttamattomuus

Normaaleissa olosuhteissa indusoijan poistamisen jälkeen geeniekspression pitäisi palata induktiota edeltävälle tasolle. Tutkimukset ovat kuitenkin osoittaneet, että IPTG-indusoidulla geeniekspressiolla voi olla tietty peruuttamattomuus. Kun IPTG:tä käytetään indusoimaan geeniekspressiota, vaikka IPTG poistetaan, geenin ilmentymistaso voi silti pysyä korkealla tasolla, eikä sitä voida palauttaa perustasolle ennen induktiota.

Tämä peruuttamattomuus voi johtua IPTG:n aiheuttamista pitkäkestoisista -solunsisäisistä muutoksista, kuten kromatiinin rakenteen muutoksista ja transkriptiotekijöiden muutoksista, jotka ylläpitävät korkeaa geenin transkriptioaktiivisuutta. Indusoidun ilmentymisen peruuttamattomuus voi aiheuttaa suuria vaikeuksia kokeissa, erityisesti kokeissa, jotka vaativat geenin ilmentymistasojen tarkkaa säätelyä, mikä voi johtaa epätarkkoihin ja ei-toistettavissa oleviin koetuloksiin.

Vakaan molekyylirakenteensa ja luotettavan indusoivan aktiivisuutensa ansiosta IPTG:stä on tullut korvaamaton reagenssi molekyylibiologian laboratorioissa maailmanlaajuisesti. Sitä käytetään laajalti rekombinanttiproteiinien ilmentymisessä, geenitoimintojen tutkimuksessa ja mikrobitekniikan kokeissa, mikä tarjoaa vakaat induktiovaikutukset tieteelliseen tutkimukseen ja teolliseen tuotantoon. Pitkän -orgaanisen synteesiteknologian keskittymisemme ja tiukka laadunvalvonta varmistavat, että IPTG-tuotteemme säilyttävät korkean puhtauden, vakauden ja johdonmukaisuuden ja täyttävät tehokkaasti tieteellisten kokeiden ja teollisten sovellusten vaativat vaatimukset.

Ammattitaitoisen T&K-tiimin tukemana jatkamme synteesiprosessien optimointia ja tuotteiden suorituskyvyn parantamista palvellaksemme paremmin maailmanlaajuisia tutkijoita ja valmistajia. Selkeän toimintamekanisminsa, vakaiden ominaisuuksiensa ja laajan käyttökelpoisuutensa ansiosta IPTG pysyy biotieteiden tutkimuksen ydinreagenssina, ja tarjoamme jatkossakin korkealaatuisia-tuotteita ja ammattimaista teknistä tukea biotekniikan kehittämiseen.

Suositut Tagit: iptg-reagenssi cas 367-93-1, toimittajat, valmistajat, tehdas, tukkumyynti, osta, hinta, irtotavarana, myytävänä