Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd. on yksi kokeneimmista 3xflag-peptidin cas 402750-12-3 valmistajista ja toimittajista Kiinassa. Tervetuloa tukkumyyntiin korkealaatuisten 3xflag-peptidien cas 402750-12-3 myyntiin täällä tehtaaltamme. Hyvä palvelu ja kohtuullinen hinta on saatavilla.
3XFLAG-peptidion tärkeä peptidimarkkerisekvenssi, jota käytetään laajasti proteiinien ilmentämis- ja puhdistusprosesseissa biolääketieteellisessä tutkimuksessa. Molekyylikaava C120H169N31O49S, CAS 402750-12-3. Sen 23 aminohaposta koostuva sekvenssi sisältää kolme toistuvaa Asp Tyr Lys Xaa Xaa Asp -motiivia, jotka antavat sille erityisiä rakenteellisia piirteitä.
Sillä on hyvä liukoisuus tiettyihin liuottimiin. Esimerkiksi DMSO:ssa sen liukoisuus on korkea, mikä tekee siitä kätevän liuoksessa suoritettaviin operaatioihin ja kokeisiin. Lisäksi se voi myös saavuttaa hyvän liukenemisvaikutuksen veteen miedolla lämmityksellä. Sillä on myös joitain erikoisominaisuuksia. Sillä on esimerkiksi hyvä antigeenisyys ja reaktiivisuus, ja se voi sitoutua spesifisiin anti-FLAG-vasta-aineisiin. Tämä sitoutumiskyky tekee siitä laajasti käyttökelpoisen kokeissa, kuten immunosaostuksessa. Sitoutumalla kilpailevasti Anti-FLAG-vasta-aineisiin, FLAG-fuusioekspressoitu proteiini, joka sitoutuu Anti-FLAG-vasta-aineisiin, voidaan eluoida immunosaostuksen aikana, jolloin saavutetaan kohdeproteiinin lokalisointi, havaitseminen ja puhdistus.
|
Räätälöidyt pullonkorkit ja korkit:
|
|
|
Kemiallinen kaava |
C120H169N31O49S |
|
Tarkka massa |
2860 |
|
Molekyylipaino |
2862 |
|
m/z |
2861 (100.0%), 2860 (77.0%), 2862 (32.9%), 2862 (31.4%), 2863 (22.1%), 2862 (11.5%), 2863 (10.1%), 2861 (8.8%), 2864 (8.1%), 2862 (7.8%), 2863 (7.4%), 2863 (5.3%), 2863 (4.5%), 2862 (3.5%), 2864 (3.3%), 2864 (3.2%), 2865 (2.2%), 2865 (2.1%), 2864 (2.1%), 2862 (1.9%), 2862 (1.9%), 2861 (1.5%), 2864 (1.5%), 2861 (1.4%), 2864 (1.4%), 2863 (1.2%), 2864 (1.2%) |
|
Alkuaineanalyysi |
C, 50.36; H, 5.95; N, 15.17; O, 27.39; S, 1.12 |
3XFLAG-peptidion proteiinitutkimuksessa käytetty tunniste, joka koostuu 8 aminohaposta sekvenssillä DYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK. Sen päätehtävänä on toimia markkerina proteiinien ilmentymiselle ja puhdistumiselle tarjoten kätevän ja tehokkaan keinon tutkimuksessa.
1. Affiniteettipuhdistus:
Sitä voidaan käyttää leimana proteiinien puhdistukseen, ja sen korkean affiniteetin ansiosta anti-FLAG-vasta-aineisiin kohdeproteiini voidaan puhdistaa helposti. Tavallisesti kohdeproteiini kotransfektoidaan soluihin ekspressiovektorilla, joka sisältää 3X FLAG-PEPTIDiä, ja puhdistetaan sitten affiniteetilla käyttämällä anti-FLAG-vasta-aineita erittäin puhtaan kohdeproteiinin saamiseksi nopeasti ja tehokkaasti.
2. Immunologinen testaus:
Korkean immunogeenisuutensa ansiosta sitä voidaan käyttää proteiinien ilmentymisen ja lokalisoinnin havaitsemiseen. Käyttämällä spesifisiä anti-FLAG-vasta-aineita voidaan suorittaa kokeellisia tekniikoita, kuten immunoblottaus ja immunofluoresenssivärjäys, jotta voidaan nopeasti ja tarkasti havaita kohdeproteiinien ekspressiotaso ja jakautuminen.
3. Kloonisuodatus:
Sitä voidaan käyttää myös proteiinikloonien seulonnan helpottamiseksi. Proteiiniekspressiovektorien rakennusprosessissa kohdeproteiinin geenisekvenssin yhdistäminen 3XFLAG-sekvenssiin voi helpottaa positiivisten kloonien seulontaa kohdeproteiinin kanssa immuuni-detektioin ja muilla menetelmillä, mikä nopeuttaa proteiinien toiminnan tutkimusprosessia.
4. Immunosaostus:
Sitä voidaan käyttää myös proteiinien immunosaostuskokeissa. Sitomalla proteiineja, jotka sisältävät 3X FLAG-PEPTIDE-tunnisteita anti-FLAG-vasta-aineisiin, ja käyttämällä sitten adsorptiomateriaaleja, kuten A/G-agaroosia tai magneettihelmiä, kohdeproteiini ja sen vuorovaikutuksessa olevat kumppanit voidaan saostaa selektiivisesti soluuutteista proteiinien vuorovaikutusverkoston tutkimiseksi.
5. Lääkkeiden seulonta:
Sitä voidaan käyttää myös lääkeseulontatutkimuksessa. Yhdistämällä 3X FLAG PEPTIDE -tunniste kiinnostavaan proteiiniin, voidaan saavuttaa proteiinin korkea-läpäisyteho. Tällä seulontamenetelmällä voidaan löytää uusia lääkekohteita, arvioida lääkeproteiinien yhteisvaikutuksia ja niin edelleen.
6. Proteiinitoiminnan tutkimus:
Merkkien lisääminen ei merkittävästi vaikuta proteiinien luonnolliseen rakenteeseen ja toimintaan, ja siksi niillä voidaan tutkia proteiinien biologisia toimintoja, subsellulaarista lokalisaatiota, vuorovaikutuksia ja signaalinsiirtoa. Ottamalla käyttöön 3X FLAG PEPTIDE -tunniste, voidaan tehdä syvällistä tutkimusta proteiinien biologisista ominaisuuksista, mikä auttaa paljastamaan niiden vaikutusmekanismit solubiologiassa ja fysiologiassa.
3XFLAG-peptidion 8 aminohappoa sisältävä peptidi, jonka sekvenssi on DYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK. Sitä käytetään yleisesti proteiinimerkkinä kohdeproteiinien kätevään puhdistamiseen, havaitsemiseen ja tutkimukseen. Biosynteesiprosessissa se voidaan valmistaa kemiallisen synteesin tai geenitekniikan menetelmillä. Seuraavat ovat geenitekniikan menetelmien yksityiskohtaiset vaiheet:
1. Suunnittele ja syntetisoi geenejä:
Ensinnäkin on tarpeen suunnitella keinotekoinen geeni, joka sisältää 3X FLAG PEPTIDE -sekvenssin. Tämän geenin tulisi sisältää 3X FLAG PEPTIDE -sekvenssi sekä sopivat promoottorit, terminaattorit ja valintamarkkerit (kuten antibioottitoleranssigeenit). Geenien suunnittelussa tulee ottaa huomioon kohdeisännän ominaisuudet ja ilmentymistarpeet.
2. Geenikloonaus:
Seuraavaksi suunnitellut keinotekoiset geenit kloonataan sopiviin ilmentämisvektoreihin. Yleisesti käytettyjä vektoreita ovat plasmidit, virusvektorit jne. Kloonausprosessi sisältää tyypillisesti seuraavat vaiheet:
-PCR-monistus: Polymeraasiketjureaktion (PCR) avulla monistetaan kohdegeenisekvenssi templaatti-DNA:sta.
-Digestio ja yhdistäminen: PCR-tuotteet pilkotaan ekspressiovektoreilla restriktioendonukleaaseja käyttäen ja yhdistetään sitten toisiinsa DNA-ligaaseilla.
-Transformaatio: yhdistetyn ilmentämisvektorin muuntaminen bakteeri-isäntiksi, kuten Escherichia coliksi, rekombinanttiplasmidin muodostamiseksi.
-Tunnistaminen: Rekombinanttiplasmidit tunnistettiin PCR:llä, entsyymidigestiolla, DNA-sekvensoinnilla ja muilla menetelmillä sen varmistamiseksi, että kohdegeeni on onnistuneesti kloonattu vektoriin.
3. Ekspression kohdeproteiini:
Transfektoi rakennettu ekspressiovektori kohde-isäntäsoluihin, kuten nisäkässoluihin, hiivasoluihin, hyönteissoluihin jne. Solujen sisällä ekspressiovektori transkriptoidaan mRNA:ksi ja transloidaan sitten proteiineihin. 3X FLAG PEPTIDE ilmentyy yhdessä kohdeproteiinin kanssa proteiinitunnisteena.
4. Proteiinin uuttaminen:
Kerää transfektoidut solut ja suorita solujen fragmentointi, sentrifugointi ja muut käsittelyt kokonaisproteiiniuutteen saamiseksi.
5. Puhdistettu proteiini:
Käyttämällä affiniteettipuhdistustekniikoita, kuten immunosaostusta ja affiniteettikromatografiaa, kohdeproteiinit, jotka sisälsivät 3X FLAG-PEPTIDE-merkkejä, puhdistettiin kokonaisuutteesta. Tämä sisältää tavallisesti anti-FLAG-vasta-aineiden sitomisen proteiineihin, jotka sisältävät 3X FLAG-PEPTIDiä, ja sitten niiden erottamisen käyttämällä affiniteettikromatografiapylväitä tai magneettisia helmiä.
6. Tunnista proteiinit:
Puhdistettu proteiini tunnistettiin ja kvantifioitiin SDS{0}}PAGE-geelielektroforeesilla, immunoblottauksella, massaspektrometrialla ja muilla tekniikoilla sen puhtauden ja eheyden varmistamiseksi.
Haittavaikutukset
Biolääketieteellisessä tutkimuksessa ja proteiineihin liittyvissä kokeissa tag-peptideillä on ratkaiseva rooli. Ne voivat auttaa tutkijoita puhdistamaan, havaitsemaan ja paikantamaan kohdeproteiineja, mikä edistää suuresti proteiinitieteen kehitystä.3XFLAG-peptidion yleinen ja laajalti käytetty merkkipeptidi, joka koostuu kolmesta toistuvasta FLAG-merkkisekvenssistä. FLAG-tunnisteen suunnittelivat alun perin Hopp et al. vuonna 1988 ja kehittyi myöhemmin muunnelmiksi, kuten 3XFLAG, joilla on korkea affiniteetti ja spesifisyys ja jotka voivat sitoutua spesifisiin vasta-aineisiin helpottaen myöhempää eristämistä ja tunnistamista. Vaikka 3XFLAG on tuonut monia mukavuuksia kokeisiin, kuten muutkin biologiset aineet, se voi myös aiheuttaa joitain haittavaikutuksia.
Immuunijärjestelmään liittyvät haittavaikutukset
Immunogeenisuus
Immunogeenisuus viittaa aineen kykyyn stimuloida elimistön immuunijärjestelmää tuottamaan immuunivasteen . 3XFLAG, joka on eksogeeninen peptidisegmentti, voi tunnistaa kehon immuunijärjestelmässä "ei-itse"-komponentiksi, mikä laukaisee immuunivasteen. Vaikka 3XFLAG-sekvenssi on suhteellisen lyhyt, se voi joissakin tapauksissa silti aktivoida B-soluja ja T-soluja, mikä johtaa vasta-aineiden tuotantoon. Nämä vasta-aineet eivät vain sitoudu vapaaseen 3XFLAG:iin, vaan voivat myös tunnistaa ja sitoutua fuusioproteiineihin, jotka ilmentävät 3XFLAG-merkkiä, mikä vaikuttaa fuusioproteiinin normaaliin toimintaan ja jakautumiseen.
Allergiset reaktiot
Allerginen reaktio on epänormaali immuunivaste, joka johtuu siitä, että immuunijärjestelmä on liian herkkä tietyille allergeeneille. Yksittäiset henkilöt voivat kokea allergisia reaktioita, kun 3XFLAGia käytetään kokeiluun tai hoitoon. Allergisten reaktioiden oireiden vakavuus vaihtelee. Lievissä tapauksissa voi esiintyä paikallisia oireita, kuten kutinaa, ihottumaa ja punoitusta, kun taas vakavat tapaukset voivat laukaista systeemisiä allergisia reaktioita, kuten anafylaktisen shokin, jolle on ominaista jyrkkä verenpaineen lasku, hengitysvaikeudet ja tajunnan menetys, mikä muodostaa vakavan uhan hengen turvallisuudelle.
Allergiset reaktiot
Allergisten reaktioiden mekanismi liittyy pääasiassa immuunijärjestelmän IgE-vasta-aineisiin. Kun keho joutuu ensimmäisen kerran kosketuksiin 3XFLAG:n kanssa, immuunijärjestelmä tunnistaa sen allergeeniksi ja stimuloi B-soluja tuottamaan spesifisiä IgE-vasta-aineita. Nämä IgE-vasta-aineet kiinnittyvät syöttösolujen ja eosinofiilien pintaan. Kun elimistö joutuu jälleen kosketukseen 3XFLAG:n kanssa, se sitoutuu IgE-vasta-aineisiin solun pinnalla ja laukaisee syöttösolut ja eosinofiilit vapauttamaan bioaktiivisia välittäjäaineita, kuten histamiinia ja leukotrieenejä, mikä johtaa allergisten oireiden ilmaantuvuuteen.
Autoimmuunisairauksien riski
Pitkäaikainen tai toistuva altistuminen 3XFLAG:lle voi lisätä riskiä sairastua autoimmuunisairauksiin. Autoimmuunisairaudet viittaavat sairauteen, jossa kehon immuunijärjestelmä hyökkää vahingossa omien kudosten ja elimien kimppuun, mikä johtaa kudosvaurioon ja toiminnan heikkenemiseen. 3XFLAG voi saada immuunijärjestelmän tuottamaan ristiinreaktiivisia vasta-aineita ja T-soluja molekyylisimulaatiomekanismin avulla, jossa sen aminohapposekvenssi on samanlainen kuin kehon tiettyjen proteiinien sekvenssi.
Nämä immuunisolut ja vasta-aineet eivät vain hyökkää vierasta 3XFLAG:ia vastaan, vaan myös vahingoittavat vahingossa kehon normaaleja kudoksia, mikä johtaa autoimmuunisairauksiin. Esimerkiksi tietyt autoimmuunisairaudet, kuten systeeminen lupus erythematosus ja nivelreuma, voivat liittyä eksogeenisten aineiden aiheuttamiin autoimmuunireaktioihin. Vaikka tällä hetkellä ei ole olemassa selkeitä todisteita siitä, että 3XFLAG aiheuttaisi suoraan autoimmuunisairauksia, tätä mahdollista riskiä ei voida jättää huomiotta.
Vaikutus solujen toimintaan
Joissakin kokeellisissa tutkimuksissa on havaittu, että suurilla 3XFLAG-pitoisuuksilla voi olla myrkyllisiä vaikutuksia soluihin. Sytotoksisuuden ilmenemismuotoja ovat muutokset solun morfologiassa, solukalvon eheyden häiriintyminen, muutokset solunsisäisessä entsyymiaktiivisuudessa ja solujen lisääntymisen estyminen. Sen vaikutusmekanismi voi liittyä 3XFLAG:n ja solukalvon väliseen vuorovaikutukseen. 3XFLAGin vahvan negatiivisen varauksen ansiosta
se voi sitoutua positiivisesti varautuneisiin solukalvon komponentteihin sähköstaattisten vuorovaikutusten kautta, mikä muuttaa solukalvon läpäisevyyttä ja juoksevuutta, mikä johtaa solunsisäisten aineiden vuotamiseen tai haitallisten aineiden sisäänpääsyyn ulkopuolelta, mikä vaikuttaa solun normaaleihin fysiologisiin toimintoihin. Lisäksi 3XFLAG voi myös päästä solujen sisälle, häiritä signalointireittejä, proteiinisynteesiä ja muita prosesseja, mikä pahentaa soluvaurioita entisestään.
Vaikutukset solujen signalointireitteihin
3XFLAG voi häiritä solunsisäisiä signalointireittejä ja vaikuttaa solujen normaaleihin fysiologisiin aktiviteetteihin. Solujen signalointireitti on kollektiivinen termi sarjalle molekyylitapahtumia, joissa solut reagoivat ulkoisiin ärsykkeisiin säätelemällä tärkeitä prosesseja, kuten solujen kasvua, erilaistumista ja apoptoosia. 3XFLAG voi häiritä signaalireittien normaalia siirtymistä olemalla vuorovaikutuksessa signaalireitin avainmolekyylien kanssa, mikä muuttaa signaloinnin aktiivisuutta tai ilmentymistasoja.
Se voi esimerkiksi sitoutua solun pinnalla oleviin reseptoreihin, mikä estää kilpailevasti luonnollisten ligandien sitoutumista reseptoreihin ja estää signaalin välittymisen; Vaihtoehtoisesti se voi päästä soluun ja sitoutua signaalinsiirtoproteiineihin vaikuttaen proteiinin fosforylaatioon, defosforylaatioon ja muihin modifikaatioprosesseihin, häiriten signaalin lähetystä ja monistumista. Tämä solujen signalointireittien häiriö voi johtaa solujen toimintahäiriöihin, jotka vaikuttavat prosesseihin, kuten solujen lisääntymiseen, erilaistumiseen ja apoptoosiin, millä puolestaan voi olla haitallisia vaikutuksia kudosten ja elinten normaaliin kehitykseen ja toimintaan.
Vaikutukset solujen aineenvaihduntaan
Solujen aineenvaihdunta on yleinen termi soluissa tapahtuville kemiallisille reaktioille, jotka tarjoavat energiaa ja materiaalin perustan solujen elämäntoiminnalle{0}}XFLAG voi vaikuttaa solujen aineenvaihduntaprosesseihin, häiritä solujen energiantuotantoa ja ainesynteesiä. Se voi esimerkiksi vaikuttaa mitokondrioiden toimintaan, jotka ovat tärkeimpiä aerobisen hengityksen ja energian tuotannon paikkoja soluissa. 3XFLAG voi muuttaa mitokondrioiden kalvon läpäisevyyttä ja potentiaalia olemalla vuorovaikutuksessa kalvolla olevien proteiinien tai lipidien kanssa, mikä vaikuttaa mitokondrioiden hengitysketjun toimintaan ja ATP-synteesiin,
mikä johtaa riittämättömään solujen energiahuoltoon. Lisäksi,3XFLAG-peptidivoi myös häiritä solunsisäisiä prosesseja, kuten glukoosiaineenvaihduntaa ja rasva-aineenvaihduntaa, vaikuttaa aineiden synteesin ja hajoamisen tasapainoon soluissa ja vaikuttaa negatiivisesti solujen normaaleihin fysiologisiin toimintoihin.
Usein kysytyt kysymykset
Mikä on 3X FLAG?
+
-
3X FLAG -peptidi on synteettinen peptidi, jossa on 23 aminohappotähdettä. Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp-motiivi toistuu kolme kertaa peptidissä. Kahdeksan aminohappoa C--päässä muodostaa klassisen FLAG-sekvenssin (Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys).
Mitä eroa flag{0}}tagilla ja 3xflagilla on?
+
-
Flag{0}}-tunniste on yksittäinen 8 aminohapon sekvenssi, jota käytetään yleisesti immunosaostuksessa, Western blotissa ja immunofluoresenssisovelluksissa. Sitä vastoin 3x Flag--tunniste sisältää 22 aminohappoa, mikä antaa sille suuremman affiniteetin anti--Flag-vasta-aineisiin ja tekee siitä erityisen edullisen proteiinien puhdistustyönkuluissa.
Kuinka liuottaa 3X FLAG?
+
-
Varastoliuoksen valmistamiseksi liuotetaan TBS:ään (50 mM Tris-HCl, pH 7,4, 150 mM NaCl) pitoisuutena 5 mg/ml. Jaa eriin ja säilytä -20 asteessa. Toistuvaa pakastusta ja sulatusta ei suositella.
Suositut Tagit: 3xflag peptide cas 402750-12-3, toimittajat, valmistajat, tehdas, tukkumyynti, osta, hinta, irtotavarana, myytävänä